基因型
F–ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3)
产品说明
OverExpressC43(DE3)、OverExpressC41(DE3)两个菌株均起源于BL21(DE3)，其优点是可以高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白。OverExpressC41(DE3)跟BL21(DE3)的区别在于其基因组含有至少一个未知突变，这个未知突变使其获得了高效表达毒性蛋白（1-5）的能力，此突变位点参与大肠杆菌表达毒性蛋白时的细胞死亡途径；OverExpressC43(DE3)来源于OverExpressC41(DE3)，是通过筛选OverExpressC41(DE3)对另一个不同毒性蛋白的抗性菌株获得。OverExpressC43(DE3)菌株具有比OverExpressC41(DE3)更强的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力，所以说OverExpressC43(DE3)菌株与BL21(DE3)相比拥有至少两个未知突变，正是这两个未知突变使其获得了更广泛的表达毒性蛋白或疏水性蛋白的能力。此菌株含有DE3区，可同时表达T7RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。OverExpressC43(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率可达5×108cfu/μgDNA。
操作方法
1.取100μl冰上融化的OverExpressC43(DE3)感受态细胞，加入目的DNA并用指尖轻轻拨打管底混匀(避免用枪吸打)，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱培养12小时。
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