中文名称:EGY48感受态细胞
规格:0.1ml*10支
用途:生化试剂。(用于科研试验研究)
保存:-80℃
基因型
MATα,ura3,his3,trp1,LexAop(x6)-LEU2
产品说明EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating操作。Transformationmarker为:his3,trp1,ura3,报告基因为:LEU2。经PGBKT7质粒检测转化效率为104cfu/μgDNA。
操作方法
1.取100μl冰上融化的EGY48感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒1-5ug,CarrierDNA(95-100度5min,快速冰浴,重复一次)10ul,PEG/liAC500ul并吸打几次混匀,30度水浴30分钟(15min时翻转6-8次混匀)。
2.将管放42度水浴15min(7.5min时翻转6-8次混匀)。
3.5000rpm离心40s弃上清,ddH2O400ul重悬,离心30s弃上清。
4.ddH2O50ul重悬,涂板。
5.28-30度,培养48-96小时。
注意事项1.感受态细胞最好在冰上融化。2.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3.同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。