标本采集注意事项：：

1、要在较为准确病变的部位采集病变标本。

2、标本应及时处理，固定。以防止细胞自溶腐败。

3、避免异物掺入标本，如血液、粘液。

4、无菌操作，动作快，以防止并发症和扩散。

标本采集 ：

1、直接法：在女性的外阴、阴道等部位采集时，要求患者在取材前一天避免性生活，盆溶、阴道灌洗、涂药和月经期。此法可用鼻咽、眼结合膜、皮肤、口腔和肛管、咽管等部位。

2、磨擦法：使用工具如海绵磨控器、线网套和气囊等，用于鼻咽、食管、胃等处。

3、自行分泌：

1)痰液：患者人深处咳出可疑痰液，如含有血液，立即涂片并固定。此法可用于呼吸道恶性病变，肺石棉沉着及肺霉菌感染等病。当出现嗜酸性粒细胞时也可用于过敏性哮喘的诊断参考。

2)尿液：以离心后取其沉淀物。

3)乳腺分泌物：于患处按摩挤出分泌物作涂片，或用针吸法后涂片检查。

4)前列腺液：按摩腺部取分泌物。

标本固定 ：

涂片在尚未完全干燥时，投入固定剂中固定。以防止涂片细胞脱落。一般时间为10-30min。常用固定剂可选用：95%乙醇、乙醚-乙醇(乙醚与95%乙醇1：1混合)，20%甲醛，甲醇及Carnoy液

巴氏染色法：

试剂配制：

OG6染液 桔黄G0.5g 95%乙醇100ml 磷钨酸0.015g

EA36染液 0.5%亮绿SF水溶液15ml 0.5%伊红Y水溶液45ml 0.5%俾士麦棕水溶液10ml 磷钨酸0.2g 碳酸锂饱和水溶液1滴

染色方法

1、涂片固定后经梯度乙醇至水。

2、苏木素液染5-10min。流水冲洗返蓝。

3、OG6染液1-2min后，用95%乙醇洗两次。

4、入EA36或EA65染液2-3min。

5、用95%乙醇洗两次，分色。

6、梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

结果：细胞核呈蓝色。表层扁平细胞质粉红色。中间与基底旁细胞胞质蓝至绿色。