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如何进行联会复合体的染色
点击次数:374 发布时间:2016-12-27
 
3.1 材料 雄性小白鼠 
3.2 器材 
离心机、显微镜、水浴、培养皿、镊子、剪刀、吸管、烧杯、量筒、离心管(10ml)、酒精灯。 
3.3试剂 (所用试剂均为AR级) 
3.3.1 0.7%柠檬酸钠(柠檬酸三钠)溶液。 
3.3.2 3%中性福尔马林(甲醛溶液):甲醛8.3ml,醋酸钠() 1.1g,加蒸馏水91.7ml。 
3.3.3 50%硝酸银溶液 
3.3.4 明胶显影液: 称取2g明胶(gelatin)粉末溶解于99ml蒸馏水中,加1ml甲酸。 
3.3.5. 甲醇-冰醋酸 
4.实 验 方 法 
脱颈处死动物取睾丸 
↓ 
放2ml 0.7%柠檬酸钠培养皿中 
↓ 
释放曲细精管内容物(剪开白膜,用解剖针和小弯镊挟出曲细精管并剪碎,用吸管轻轻吹打) 
↓移至刻度离心管中 
加8ml 0.7%柠檬酸钠溶液制成细胞悬液 
↓ 
室温下低渗45~60min 
↓ 
低渗终止前10min,加3%中性甲醛溶液0.3ml,至最终浓度为0.1%,混匀 
↓ 
常规离心(1000r/min) 
↓弃上清 
甲醇和冰醋酸(3:1)混合液固定 
↓ 
空气干燥法制片(关键是长时间的低渗液处理和添加福尔马林溶液) 
↓ 
银染 
 
 
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