钙检测试剂试盒说明书
(甲基百里香酚蓝比色法)
一、测定原理:
血清中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合,生成蓝色络合物。通过比色与同样处理的钙标准进行比较,可计算出钙的含量。
二、试剂组成与配制:(30管/25样)
1. 试剂一:MTB试剂,40mlX1瓶,4℃~8℃避光保存。
2. 试剂二:碱性溶液,100mlX1瓶,室温保存。
3. 试剂三:蛋白澄清剂,5mlX1瓶,室温保存。
4. 试剂四:2.5mmol/L钙标准液:1mlX1支,4℃避光保存。
三、操作步骤:
1、血清操作步骤:
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空白管
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标准管
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测定管
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MTB试剂(ml)
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1.0
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1.0
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1.0
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碱性溶液(ml)
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2.0
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2.0
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2.0
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去离子水(ml)
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a*
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2.5mmol/L钙标准液(ml)
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a*
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样本(ml)
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a*
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混匀,静置5分钟后,波长610nm,1cm光径,空白管调零,测各管吸光度。
a*参考取样量:血清10~50ul,定值血清、标准品及去离子水量与样本相同。
标准品及去离子水用量与样本相同。
四、计算:
(一)、血清(浆)的计算公式及举例:
1、计算公式:
2、计算举例:
取血清30ul按上表进行检测,测得标准管吸光度为0.208,测定管吸光度为0.187,则计算结果为:
五、注意点:
1、玻璃器材需严格清洗,避免钙的污染,建议最好用一次性塑料管。
2、严重溶血、黄疸或脂血对结果有影响。
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