钙试盒说明书
（甲基百里香酚蓝比色法）
一、测定原理:
血清中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝（MTB）结合，生成蓝色络合物。通过比色与同样处理的钙标准进行比较，可计算出钙的含量。
二、试剂组成与配制：（30管/25样）
1.试剂一：MTB试剂，40mlX1瓶，4℃避光保存6个月。
2.试剂二：碱性溶液，100mlX1瓶，室温保存6个月。
3.试剂三：蛋白澄清剂，5mlX1瓶，室温保存6个月。天冷时会凝固，用时水浴加热至透明后方可使用。
2.5mmol/L钙标准液：1mlX1支，4℃避光保存6个月。
三、操作步骤：
1、血清操作步骤：
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空白管
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标准管
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测定管
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去离子水（ml）
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a*
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2.5mmol/L钙标准液（ml)
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a*
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血清
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a*
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MTB试剂（ml）
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1.0
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1.0
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1.0
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碱性溶液（ml）
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2.0
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2.0
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2.0
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混匀，静置5分钟后，波长610nm，1cm光径，双蒸水调零，测各管吸光度。
2. 组织匀浆操作步骤：
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空白管
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标准管
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测定管
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去离子水（ml）
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a*
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2.5mmol/L钙标准液（ml)
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a*
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组织匀浆上清液（ml)
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a*
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MTB试剂（ml）
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1.0
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1.0
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1.0
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碱性溶液（ml）
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2.0
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2.0
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2.0
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蛋白澄清剂（ml）
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0.1
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0.1
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0.1
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混匀，静置5分钟后，波长610nm，1cm光径，双蒸水调零，测各管吸光度。
a*参考取样量：血清10~50ul，10%组织匀浆30~100ul。
标准品及去离子水用量与样本相同。
四、计算公式与举例：
（一）、血清（浆）的计算公式及举例：
1、计算公式：
2、计算举例：
取血清30ul按上表进行检测，测得空白管吸光度为0.445，标准管吸光度为0.653，测定管吸光度0.632。则计算结果为：
（二）、 组织匀浆的计算：
1、计算公式：
注：gprot/L为克蛋白/升。
2、计算举例：
取10%鼠肝脏组织匀浆50ul按上表进行检测，测得空白管吸光度为0.445，标准管吸光度为0.653，测定管吸光度0.485，同时测得10%匀浆蛋白浓度为8.06gprot/L。则计算结果为：
五、注意点：
1、玻璃器材需严格清洗，避免钙的污染，建议最好用一次性塑料管。
2、严重溶血、黄疸或脂血对结果有影响。
3、制备组织匀浆时，避免钙污染。
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