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淀粉酶(AMS)测试盒说明书
点击次数:564 发布时间:2013-12-05
 

淀粉酶(AMS)测试盒说明书

                                  -淀粉比色法)

一、测定原理:

       淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精,在底物浓度已知并且过量的情况下,加入碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物,根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量,从而计算出AMS的活力。                      

二、试剂组成与配制:(100T/96样)

1.试剂一:0.4mg/ml底物缓冲液,60ml*1瓶,4℃避光保存6个月。

2.试剂二:0.1mol/L碘贮备液,7ml*1瓶,4℃室温保存6个月。

0.1mol/L碘应用液的配制:按碘贮备液:双蒸水=1:9稀释,现用现配4℃避光保存。

三、操作表:

 

 

 

测定管

空白管

底物缓冲液(ml37℃预温5分钟

0.5

0.5

待测样本(ml

0.1

 

混匀,37℃水浴,准确反应7.5分钟

碘应用液(ml

0.5

0.5

双蒸水(ml

3.0

3.1

       

 

 

 

 

 

         

混匀,波长600nm1cm光径,双蒸水调零,测各管吸光度。

     注:不同样本批量测试前需要做预实验,确定最佳取样浓度,将(空白OD-测定OD控制住0.05~0.150之间)

四、计算公式与举例:                                

1.血清(浆)计算举例:

单位定义:100ml血清(浆)中的AMS,在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉为10个单位。

计算公式:

计算举例:

       取某人血清用生理盐水10倍稀释后取样0.1mlAMS测定,测定管OD0.308,空白管OD0.383,则计算结果为:

 

2.组织中计算与举例

 单位定义:组织中每毫克蛋白在37℃与底物作用30分钟,水解10mg淀粉定义为1个淀粉酶活力单位。

  计算公式:

计算举例:

11%大鼠肺匀浆0.1mlAMS测定,测定管OD0.275,空白管OD0.383,1%大鼠肺匀浆的蛋白浓度为0.5677mgprot/ml,则计算结果为:

22.5%鱼肠匀浆0.1ml作作AMS测定,测定管OD0.274,空白管OD0.388,2.5%鱼肠匀浆的蛋白浓度为0.5960mgprot/ml,则计算结果为:

 

 

 
 
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